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本制品是2×Mix预混合试剂，能够实现在单个反应孔中进行多重荧光定量PCR。本制品含有基因改造的热启动Taq酶，极大地提高了扩增灵敏度和特异性，本制品对多重反应缓冲体系进行了深度优化，能够提高反应的扩增效率，促进低浓度模板的有效扩增。本制品可用于基因分型和基因多重定量分析。

组分	规格
2×Hiper Spec multiplex TaqMan qPCR Mix	1mL
50×Low Rox	40μL
50×High Rox	40μL

保存：-20℃，有效期1年。

• 请于使用前确保产品完全解冻并彻底混匀，短暂离心收集至管底后置于冰上备用。
  
• 为避免样品间交叉污染和气溶胶污染，推荐在超净台中进行反应体系的配制。
  
• 使用过程中避免产品的反复冻融。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

• 探针法qPCR反应体系：
  

  成分	用量	终浓度
  2×Hiper Spec TaqMan multiplex qPCR Mix	10μL	1×
  Primer mix	x	0.1～1μM
  TaqMan Probe mix	y	50～300nM
  50×ROX	0.4	1×
  模板DNA/cDNA	1～100ng	－
  ddH2O	至10μL	－

  • 上表中模板量和引物浓度以及探针浓度均为推荐量，可根据具体实验情况进行调整，选择最适投入量和浓度
    
  • 一般情况下，每条引物浓度为0.2μM即可得到较好的扩增效果，引物浓度可在0.1～1μM的范围内进行调节；
    
  • 反应体系可根据实验需求进行等比例调节，模板体积不超过总体积的1/10。
• 参考qPCR扩增程序：
  

  步骤	温度	时间	循环数
  预变性	95℃	5min	1
  变性	95℃	5sec	40
  退火/延伸	60℃	30sec

  • 某些情况下，可通过调节退火延伸时间提高多重qPCR反应的性能；
    
  • 反应结束后可通过琼脂糖凝胶电泳确认产物的特异性。

Bio-Rad:CFX96,CFX384,iCycleriQ,iQ5,MyiQ,MiniOpticon,Opticon,Opticon2,Chromo4;
Eppendorf:Mastercyclereprealplex,realplex2s;
Qiagen:Corbett Rotor-Gene Q,Rotor-Gene 3000,Rotor-Gene 6000;
RocheApplied Science: LightCycler 480,LightCycler 2.0;Lightcycler 96;
Thermo Scientific: PikoReal Cycler;Cepheid:SmartCycler;Illumina:Eco qPCR.
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